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雞禽流感H9

雞禽流感H9

產品型號:

所屬分類:動物疾病類ELISA快速檢測試劑盒

產品時間:2022-07-22

簡要描述:雞禽流感病毒H9亞型抗體檢測試劑盒*中,有需要請!

詳細說明:

雞禽流感病毒H9亞型抗體檢測試劑盒

 

介紹

雞禽流感病毒(H9)抗體檢測試劑盒檢測雞血清中的禽流感病毒H9抗體,用于評估養雞場雞禽流感疫苗免疫狀況及感染雞的血清學輔助診斷。

本試劑盒采用間接ELISA法,在酶標板微孔上預包被禽流感H9抗原。在試驗中,加入稀釋后的待檢血清,經過溫育后,若樣品中含有禽流感H9特異性抗體,則與包被板上的抗原結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后;加入酶標二抗,與檢測板上的抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶結合物;在微孔中加入TMB底物液,經酶催化形成藍色產物,加入終止液終止反應后,用酶標儀450nm波長測定反應孔中的吸光度A值。

需自備的設備及試劑

1.微量移液器: 0.5µl~10µl、10µl~100µl、100µl~1000µl。

2.一次性移液器吸頭。

3.量筒:500ml。

4.96孔板酶標儀。

5.蒸餾水或去離子水。

6.洗瓶或洗板機。

樣品制備

取動物全血,按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血。

洗滌液的準備

濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫,如有鹽結晶,搖動使結晶的鹽溶解,然后用蒸餾水或去離子水作10倍稀釋。稀釋好的洗滌液可在4℃存放一周左右。

樣品的稀釋

在血清稀釋板中按1:101的體積比稀釋待檢血清(例如:200μl樣品稀釋液中加2μl待檢血清)。

注意:陰性和陽性對照不用稀釋。取每個樣品后都要更換吸頭,準確記錄每個樣品在板上的位置。每個樣品在加入到包被板微孔前應充分混勻。

注意事項

1.試劑盒使用前各試劑應平衡至室溫,使用前應搖勻,使用后放回2~8

2.不同品種、不同批號試劑盒的試劑組分不得混用,使用試劑時應防止試劑污染。

3.底物和終止液對皮膚和眼可能有刺激性,使用時應該注意防護。

4.TMB(底物B液)不要暴露于強光和避免接觸氧化劑。

5.檢測板拆封后應避免受潮或沾水(未用完的抗原包被板加干燥劑放于自封袋中,并盡快置于2~8)。

6.所有廢棄物在丟棄之前應合理處理以免污染。

7.嚴格遵守操作說明可以獲得的結果。操作過程中移液、定時和洗滌等的全部過程必須精確。

8.血清稀釋板為一次性用品,不得重復使用;血清稀釋板的大容量為300μl/孔。

 

操作步驟

1.    取預包被的檢測板(根據樣品多少,可拆開分次使用),將稀釋好的待檢血清取100μl加入到檢測板孔中。同時設陰性、陽性及空白對照各1孔,取陰性及陽性對照各100μl分別加入反應孔中,空白對照僅加入100μl樣本稀釋液。輕輕振勻孔中樣品(勿溢出)。

2.蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。

3.小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,用洗滌液洗3次。每次用洗滌液注滿板孔(約350μl),靜置1分鐘后甩掉。洗滌3次后在干凈吸水紙上拍干。

4.每孔加酶結合物100μl,蓋上封板膜,置37℃溫育30分鐘。

5.小心揭開封板膜,甩掉板孔中的溶液,洗滌3次, 方法同2。切記后在干凈吸水紙上拍干。

6.每孔先加底物A液50µl、再加底物B液50µl,混勻、蓋上封板膜37閉光顯色10分鐘。

7.每孔加終止液50μl,使反應終止,10分鐘內測定結果。

 

結果判定

以空白對照調零用酶標儀于450nm(630nm作參比波長)讀取吸光度A值。試驗成立的條件是陽性對照孔A450值大于或等于0.5,陰性對照孔A450值必須小于0.2。如果試驗無效,試驗中的操作值得懷疑,試驗應重做,并仔細檢察各組分。

樣品A450值大于0.2+陰性對照孔均值,判為陽性;樣品A450值小于0.2+陰性對照孔均值,判為陰性;如陰性對照孔均值小于0.05按0.05計算。

 

有效期

貯存方法: 2 - 8ºC下貯存。

有效期: 12個月。

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