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RNA Pulldown、DNA Pull-down

RNA Pulldown、DNA Pull-down

產品型號:

所屬分類:免疫學實驗

產品時間:2022-05-18

簡要描述:RNA Pulldown、DNA Pull-down
收費標準/服務周期/提供結果:
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詳細說明:

RNA Pulldown、DNA Pull-down

 

 

實驗意義

 

核酸與蛋白質的互作是細胞功能的核心,包括蛋白質合成、mRNA組裝等生命活動中重要的代謝過程,研究核酸與蛋白質的互作是研究生命科學的基本工具。

 

實驗原理及步驟

RNA Pull-down:通過體外轉錄RNA并用生物素進行標記,然后與胞漿蛋白混合物共同孵育形成RNA-蛋白質復合物,然后用鏈委親和素標記的磁珠分離純化該復合物(利用生物素與鏈霉親和素的非共價親和作用)。洗脫后進行檢測,如果檢測蛋白為已知蛋白可通過WB進行鑒定,如果檢測未知蛋白則可以結合質譜進行鑒定。流程為提取細胞胞漿蛋白樣品液- -體外轉錄合成生物素標記RNA-共孵育_ -磁珠純化- -洗脫得到互作蛋白. -WB或質譜鑒定。

DNA Pull-down:通過合成標記有生物素的DNA+*片段,與細胞核蛋白混合物共同孵育形成DNA-蛋白質復合物,然后用鏈垂親和素磁珠純化,WB或者質譜進行檢測鑒定。流程為提取核蛋白樣品液- -合成生物素標記DNA-共孵育- -磁珠純化- ~洗脫得到互作蛋白- -WB或質譜鑒定。

 

結果展示

RNA Pull-down

 

 

 

 

DNA Pull-down .

 

 

 

實驗周期及交付標準

1.實驗周期: 1-2個月

2.交付標準:

RNA Pull-down:探針序列、X光片.實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)

DNA Pull-down:探針序列、X光片.實驗報告(實驗步驟.試劑、儀器等)

 

需確認信息

1.目的基因種屬及ID號

2.基因序列信息

3.樣本種屬及類型

4.樣本數量.

5.分析要求

參考文獻

[1]Chen R,Liu Y,Zhuang H,et al. Quantitative proteomics reveals that long non-coding RNA MAL AT1 interacts withDBC1 to regulate p53 acetylation[J]. Nucleic Acids Research, 2017, 45(17):9947-9959.

[2]Tran D H , Shishido Y,Chung S P , et al. lnentication of DNA-binding proteins that interact with the 5-f1anking regionof the human D-amino acid oxidase gene by pull-down assay coupled with two-dimensional gel electrophoresis andmass spectrometry[J]. Journal of Pharmaceutical & Biomedical Analysis, 2015, 116:94-100.

 

實驗代做服務:

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動物模型服務

流式細胞檢測

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

細胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實驗

microRNA測序

動物實驗

探針合成

ATP/ADP檢測

石蠟/冰凍切片

定點突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細胞生長曲線的測定

藥理毒理動物實驗

 

免疫共沉淀

真核表達載體構建

染色質免疫沉淀CHIP

非標定量(Label-free)實驗



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