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核仁組成區嗜銀-AGNOR染色實驗服務

核仁組成區嗜銀-AGNOR染色實驗服務

產品型號:

所屬分類:病理學檢測實驗

產品時間:2022-05-18

簡要描述:提供商: 上海研謹生物
服務名稱: 核仁組成區嗜銀-AGNOR染色
規格: 樣本

詳細說明:

 

核仁組區嗜銀-AGNOR染色實驗服務

 

.核仁組成區嗜銀(AGNOR)染色簡介

核仁組成區(NORs)是染色體上的一個編碼核糖體RNA(rRNA)的片段,存在于DNA特異性環上,凸向核仁。在電鏡下,核仁組成區為在電子致密區中的境界不清的淺染區域。在石蠟切片上,在核仁中見到的每一個點狀反應顆粒有可能代表多 個AgNOR位點。核仁組成區嗜銀蛋白染色主要特點是操作簡便、批量染色的較為經濟, AgNOR位點的數量增加與細胞增殖性增加有關,對于良惡性腫瘤的鑒別具有一定的意義。

二、試劑配制

1. AgNOR染色液

甲液:明膠2 g溶于雙蒸水至99 ml,在60°C使之完全溶解,再加入純甲酸1 ml搖勻待用。

乙液: AgNO350 g溶解于雙蒸水中至100 ml, 4°C冰箱保存。

2. AgNOR工作液

取甲液10 ml,乙液20 ml臨用前混合。

三、染色步驟

1.切片脫蠟至水

2.雙蒸水洗2次

3.AgNOR工作液中(25°C) 浸染30分鐘(暗處進行) (鏡下觀察)

4.脫水,透明,封固

5結果:油鏡觀察,細胞核及胞質背暴為淡黃色,AgNOR呈棕黑色顆粒狀。

四、樣本說明

1、 石蠟切片

取材: 1.組織離體后需及時固定; 2.組織標本不宜過大、過厚。

固定: 1.固定液: 10%福爾馬林(4%Paraformaldehyde) 或10%中性甲醛: 2.用量: -般固定液的量與組織體積比為

10:1~20:1; 3. 固定:適宜的固定時間,主要根據材料的大小松密程度及固定液的穿透速度而定。

保存:切片經60°C烤片3-5小時后,可于常溫或4°C干燥保存。

2.冰凍切片

取材:取材后需立即置于超低溫冰箱或液氮中保存。

固定:樣本冰凍切片后,應立即放入甲醇、acetone. 95%酒精、 4%Paraformaldehyde等固定液中固定。

保存:固定好的切片自然風干,密封后置于-80°C. -20°C保存, 盡快用于后續實驗。

3.細胞塊石蠟切片

細胞量較多的樣品,可離心分離所需細胞,用中性甲醛固定后制作成瓊脂細胞塊,然后按照制作石蠟切片的操作流程進行切

片。

4、細胞爬片

在孔板里做的細胞爬片,爬片取出后,用PBS洗滌2次(根據研究目的,PBS洗滌可選擇不做)。用4%Paraformaldehyde49C固定15分鐘,將表面液體吹干,置于-20°C保存。若在短時間內即開展實驗,可在加固定液后,于4°C冰箱中放置一段時間。

5.細胞涂片細胞涂片常用的固定液有95%酒精(常用)、酒精 Glacial acetic acid solution. Ethyl ether-酒精液和

Carney's液等。

、注意事項

1.常用的固定液為中性甲醛和4%Paraformaldehyde, 能使大多數抗原保存良好,適用于免疫組織化學。

2.病理實驗切片zui好是防脫片,以免實驗過程中出現掉片。若客戶提供切片,應告知切片有無防脫處理。

3.骨組織、皮膚組織或脂肪含量較高的樣本,實驗過程中有較高的掉片幾率。

4.客戶可提供組織塊(以10%福爾馬林、4%Paraformaldehyde或10%中性甲醛固定, 如組織塊極小請事先說明) . 蠟塊

或切片(使用免疫組化切片,以避免實驗過程中掉片)

5.待檢測蛋白的種屬、實驗分組情況及實驗背景資料、其他具體要求等需事先說明。

6.若客戶提供骨組織或鈣化程度較高的組織進行實驗,需進行脫鈣處理。

7.浸泡在固定液中的組織樣本,在運輸中容器需密封,防止破碎、滲漏。

 

 

實驗代做服務:

ELISA試劑盒免費代檢測

CCK8檢測

基因組DNA提取

 

蛋白相互作用分析

Western Blot

免疫組化

熒光定量PCR

動物模型服務

流式細胞檢測

ROS氧化分析

激光共聚焦

DNA甲基化實驗

細胞劃痕

鈣離子濃度檢測

掃描電鏡實驗

microRNA測序

動物實驗

探針合成

ATP/ADP檢測

石蠟/冰凍切片

定點突變

線粒體膜電位(MMP)檢測

細胞生長曲線的測定

藥理毒理動物實驗

 

免疫共沉淀

真核表達載體構建

染色質免疫沉淀CHIP

非標定量(Label-free)實驗



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