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孔雀石綠檢測試劑盒

孔雀石綠檢測試劑盒

產品型號:

所屬分類:獸 藥 殘 留 ,激素類ELISA快速檢測試劑盒

產品時間:2022-05-18

簡要描述:孔雀石綠檢測試劑盒可檢樣本:水產(魚蝦)、水樣在微孔條上預包被偶聯抗原,樣本中的殘留物孔雀石綠將和 微孔條上預包被的偶聯抗原競爭抗孔雀石綠抗體, 加入酶標記物后,用 TMB 底物顯色,樣本吸光值 與其所含殘留物孔雀石綠的含量成負相關,與標準曲線比較即可得出相應殘留物孔雀石綠的含量。

詳細說明:

類(elisa試劑盒)

 

產品名稱

包裝規格

靈敏度

可檢樣本

笨乙醇胺A檢測試劑盒(新產品)

96

0.25ppb

肉、飼料、尿液

可樂啶快速檢測試劑盒(新產品)

96

0.05ppb

肉、飼料、尿液、血清

賽庚啶快速檢測試劑盒(新產品)

96孔

0.05ppb

肉、飼料、尿液、血清

呋喃唑酮代謝物(AOZ)快速檢測試劑盒

96孔

0.02 ppb

組織、蜂蜜、水產

呋喃它酮代謝物(AMOZ)快速檢測試劑盒

96孔

0.1 ppb

水產(魚蝦)、蜂蜜、雞肉、雞肝, 奶樣

呋喃妥因代謝物(AHD)快速檢測試劑盒

96孔

0.05 ppb

水產(魚蝦)、蜂蜜、雞肉、雞肝、奶樣

呋喃西林代謝物(SEM)快速檢測試劑盒

96孔

0.1 ppb

水產(魚蝦)、蜂蜜、雞肉、雞肝, 奶樣

新霉素(Neomycin)快速檢測試劑盒

96孔

0.5ppb

豬肉/肝、雞鴨肉/肝           蝦魚、蜂蜜

四環素類(TC)快速檢測試劑盒

96孔

0.05 ppb

雞肉/鴨肉、豬肉/豬肝、水產、蜂蜜

氯霉素(CAP)快速檢測試劑盒

96孔

0.05 ppb

動物組織、水產、蜂蜜、腸衣、尿液、雞蛋、牛奶、血清  

氟苯尼考 (FF)快速檢測試劑盒

96孔

0.5 ppb

動物組織、水產、蜂蜜、腸衣、尿液、雞蛋、牛奶、血清  

克倫特羅檢(CLE) 快速測試劑盒

96

0.1ppb

豬肉、豬肝、 血清            飼料、豬尿

萊克多巴胺(RACT)檢測試劑盒

96孔

0.1/0.03ppb

尿液

沙丁胺醇(Salbutamal)快速檢測試劑盒

96孔

0.5 ppb

肉類、肝臟、尿液、配合料、濃縮料、預混料

β-興奮ji快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

尿樣、血清、組織、飼料

喹諾酮類藥物(QNS)快速檢測試劑盒

96

1 ppb

組織、蝦魚、血清、蜂蜜

恩諾沙星(EN)快速檢測試劑盒

96

0.25 ppb

組織、蝦魚、血清、蜂蜜

氨芐青霉素(AM)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

豬肉/肝、雞鴨肉/肝           蝦魚、蜂蜜、牛奶

青霉素G(BP)快速檢測試劑盒

96

0.05 ppb

豬肉/肝、雞鴨肉/肝           蝦魚、蜂蜜、牛奶

泰樂菌素(TYL)快速檢測試劑盒

96

1.5 ppb

肌肉、肝臟、蜂蜜

鏈霉素(Str)快速檢測試劑盒

96

0.5 ppb

肌肉、水產、肝臟、蜂蜜、牛奶

鏈霉素(Str)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

肌肉、水產、肝臟、蜂蜜、牛奶

喹乙醇(olaquindox)快速檢測試劑盒

96

1ppb

組織、飼料

安定(Dia)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

豬肉/肝、雞肉/肝 、飼料、尿液

己烯雌酚(DES)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

雞肉、雞肝、飼料、尿液 、水產(魚蝦)

慶大霉素(Gen)快速檢測試劑盒

96

0.1 ppb

雞肉、雞肝、血清

三聚氰胺(Melamine)快速檢測試劑盒

96

1ppb

牛奶、組織、蛋類、飼料

孔雀石綠檢測試劑盒

96

0.025 ppb

水產(魚蝦)、水樣

磺胺多殘留快速檢測試劑盒

96

0.4 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺二甲基嘧啶(SM2)快速檢測試劑盒

96

1 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺對甲氧嘧啶(SMD)快速檢測試劑盒

96

0.4 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺甲噁唑(SMZ)快速檢測試劑盒

96

0.4 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺類三殘留快速檢測試劑盒

96

1 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

磺胺喹噁啉(SQX)快速檢測試劑盒

96

1 ppb

雞肉/肝、豬肉/肝、蜂蜜 、雞蛋、血清、尿液、牛奶

 

 

 

 

EF02103 2014-01

 

孔雀石綠快速檢測試劑盒說明書

 

一、原理

本試劑盒采用間接競爭 ELISA 方法,在微孔條上預包被偶聯抗原,樣本中的殘留物孔雀石綠將和 微孔條上預包被的偶聯抗原競爭抗孔雀石綠抗體, 加入酶標記物后,用 TMB 底物顯色,樣本吸光值 與其所含殘留物孔雀石綠的含量成負相關,與標準曲線比較即可得出相應殘留物孔雀石綠的含量。

二、試劑盒特性

試劑盒靈敏度:  0.05ppb

孵育溫度:    25

孵育時間:    30min30min15min

樣本檢測限

 

水樣 ——————  0.1ppb

 

水產品 —————— 0.5ppb

 

  • 交叉反應率

 

顯性孔雀石綠 ————————

100%

隱性孔雀石綠 ————————

0.1%

結 晶 紫

——————————

95%

隱性結晶紫

——————————

0.1%

 

  • 樣本回收率

 

水樣、水產品 ————————  80%~110%

精密度

板內、板間變異系數≤12%

三、試劑盒組成

 

1

微量測試孔

每條 8 孔,一板 12 條

 

 

 

 

 

10 倍濃縮標準液

0ppb

0.5ppb

 

×6 瓶

 

 

2

1.5ppb

4.5ppb

 

 

 

 

 

1ml/瓶、黑色帽) 13.5ppb

40.5ppb

3

酶標記物

12ml

紅色帽

 

 

 

 

4

抗體工作液

7ml

藍色帽

 

 

 

 

 

5

底物 A 液

7ml

白色帽

 

 

 

 

6

底物 B 液

7ml

黑色帽

 

 

 

 

7

終止液

7ml

黃色帽

 

 

 

 

8

20X 濃縮洗滌液

40ml

白色帽

 

 

 

 

9

氧化劑

3ml

黑色帽

 

 

 

 

10

4X 濃縮復溶液

50ml

透明帽

 

 

 

 

 

四、所用儀器、試劑

具備的儀器:酶標儀、均質器、振蕩器、離心機、 刻度移液管、天平(感量 0.01g)、氮 吹儀、恒溫箱

微量移液器:單道 20200µl、單道 1001000µl

多道 30300 µl

劑:乙腈、二氯甲烷、無水硫酸鈉、正己

 

五、樣本前處理步驟

樣本處理前須知

a)實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試 劑時要更換吸頭。

b)實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈, 必要時可對實驗器具進行清潔,以避免污染干擾實 驗結果。

樣本前處理需配制: 配液 1 樣品提取液

乙腈-二氯甲烷混合溶液:

V 乙腈-V 二氯甲烷 = 4 : 1 40ml 乙腈, 再加入 10ml 二氯甲烷,混勻后使用。

配液 2 樣品復溶液

4X 濃縮復溶液用去離子水按 13 稀釋 (1 份 4×濃縮復溶液+3 份去離子水),或按所需用 量配制。

樣本處理:

a)水樣處理方法

50µl 清澈水樣樣直接測定(如果水樣渾濁 一定要過濾或 4000r/min 離心 10min,直至得到 清澈樣),暫不使用的樣本應冷凍保存。

樣本稀釋倍數:  1 倍

b)水產品處理方法

1、稱取 2±0.05g 均質組織樣品于 50ml 離心管中, 加入 6ml 樣品提取液(配液 1),2g 無水硫酸 鈉,振蕩 5min ,室溫(25℃左右)4000r/min以上離心 10min

2、取 3ml 上清液,加入 20µl 氧化劑,搖勻,在 56 條件下氮氣或空氣流吹至完全干燥;

3、加入 1ml 正己烷,加入 1ml 樣品復溶液(配液

2),振蕩搖勻 1min4000r/min 以上離心 5min

4、取下層 50 µl 用于分析;

樣本稀釋倍數:  1 倍

注:此方法所得到的結果為孔雀石綠;隱性孔 雀石綠;結晶紫;隱性結晶紫的總量。

六、酶標免疫分析程序:

測定前應須知:

1、 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫 2025℃)。

2、 使用之后立即將所有試劑放回 28℃。

3、 在 ELISA 分析中的再現性,很大程度上取決于 洗板的*性,正確的洗板操作是 ELISA 測定 程序中的要點。

4、 所有恒溫孵育過程,避免光線照射,用蓋板膜 蓋住微孔板。

操作步驟:

1、從 28℃冷藏環境中取出所需試劑,室溫(20 25℃)平衡 30min 以上,注意每種液體試劑使 用前均須搖勻。

2、取出框架及需要數量的微孔,將不用的微孔放 入自封袋,保存于 2-8℃。

3、配液 1:將 40ml 濃縮洗滌液(20 倍濃縮)用去 離子水按照 119 稀釋(1 份濃縮洗滌液+19 份 去離子水),或按所需用量配制洗滌液。

配液 2

配制孔雀石綠標準液:取一定量的 10 倍濃縮

標準液用樣品復溶液 10 倍稀釋,現配現用, 具體如下:

標準液6配制4.05ppb 標準液--50ul 40.5ppb

標準液加 450ul 樣品復溶液混勻;

標準液5配制1.35ppb 標準液--50ul 13.5ppb

標準液加 450ul 樣品復溶液混勻;

標準液 4配制 0.45ppb 標準液-- 50ul 4.5ppb

標準液加 450ul 樣品復溶液混勻;

標準液 3配制 0.15ppb 標準液-- 50ul 1.5ppb

標準液加 450ul 樣品復溶液混勻;

標準液 2配制 0.05ppb 標準液-- 50ul 0.5ppb

標準液加 450ul 樣品復溶液混勻;

標準液 1配制 0ppb 標準液-- 50ul 0ppb 

準液加 450ul 樣品復溶液混勻;

4、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每 個樣本和標準品做 2 孔平行,并記錄標準孔和 樣本孔所在的位置。

5、加標準品/樣本 50µl/孔到各自的微孔中,然后加 入抗體工作液 50µl/孔,用蓋板膜封板,輕輕振 蕩混勻。25℃環境中反應 30min

6、將孔內液體甩干,用已稀釋的洗滌液 250µl/ 洗板 45 次,每次間隔 1530 秒,用吸水紙 拍干(拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺 破)。

7、每孔加入酶標記物 100µl,蓋板膜蓋板后置25 環境中反應 30min。將孔內液體甩干,用洗滌 液充分洗,45 遍(同上),用吸水紙拍干(拍 干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。

8、顯色:加入底物 A  50µl/孔,再加入底物 B 50µl/孔,輕輕振蕩混勻,25℃環境中避光顯 15min

9、測定:加入終止液 50µl/孔,輕輕振蕩混勻,設 定酶標儀于 450nm 處(建議用雙波長 450/630n m 檢測,5min 內讀數),測定每孔 OD 值。

七、結果判定

結果判定有兩種方法,粗略判定可用第 1 種方 法,定量判定用第 2 種方法。注意樣本吸光度值與 其所含孔雀石綠量成負相關。

1、粗略判定:

用樣本的平均吸光度值與標準值比較即可得出 其濃度范圍(ng/ml)。假設樣本 1 的吸光度值為 0.3, 樣本 2 的吸光度值為 1.0,標準液吸光度值分別是:

0ppb  2.2430.05ppb  1.8160.15ppb  1.415 變質。

0.45ppb  0.741.35ppb  0.3134.05ppb  0.155  8、該試劑盒zui佳反應溫度為 25℃,溫度過高或過

則樣本 1 的濃度范圍是 1.35ppb4.05ppb;樣本 2

的濃度范圍是 0.15ppb0.45ppb,乘以其對應的 釋倍數即為樣本中孔雀石綠實際濃度。

2、定量分析

1)百分吸光率的計算,標準品或樣本的百分 吸光率等于標準品或樣本的吸光度值的平均值(雙 孔)除以*個標準(0 標準)的吸光度值,再乘 以 100%,即

 

B

百分吸光率(%)= ×100% B0

低將導致檢測吸光度值和靈敏度發生變化。

 

九、儲藏條件和保質期

 

1、儲藏條件:試劑盒于 2-8℃保存,不要冷凍。 2、保 質 期:該產品有效期為 1 年,生產日期見

包裝盒。

提示:酶標板真空包裝袋若有漏氣,酶標板仍然正 常有效,不影響實驗結果,請放心使用。

 

B—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值 B0—0ng/ml 標準溶液的平均吸光度值

2)標準曲線的繪制與計算 以標準品百分吸光率為縱坐標,以孔雀石綠標準品濃度(ng/ml)的半對數為橫坐標,繪制標準曲 線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標 準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的 釋倍數即為樣本中孔雀石綠實際濃度。若利用試劑盒專業分析軟件進行計算,更便于 大量樣本的準確、快速分析。

八、 注意事項

1、室溫低于 25℃或試劑及標本未回到室溫(2025℃)會導致所有標準的 OD 值偏低。

2、在洗板過程中如果出現板孔干燥的情況,則會 伴隨著標準曲線不成線性,重復性不好的現象。 所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。

3、混合要均勻,否則會出現重復性不好的現象。

4、反應終止液為 2M 硫酸,避免接觸皮膚。

5、不要使用過了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜 使用會引起靈敏度、OD 值變化;不要交換使用 不同批號的盒中試劑。

6、不用的微孔板放進自封袋重新密封;標準物質 和無色的發色劑對光敏感,因此要避免直接暴 露在光線下。

7、顯色液若有任何顏色表明變質,應當棄之。標 準品 1 的吸光度值小于 0.5 時,表示試劑可能

 

 

 



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